ОБОБЩЕНИЕ И ОБЯСНЕНИЕ НА ТЕСТА
Лептоспирозата се среща по целия свят и е често срещан лек до тежък здравословен проблем за хора и животни, особено в райони с горещ и влажен климат.Естествените резервоари на лептоспирозата са гризачи, както и голямо разнообразие от домашни бозайници.Човешката инфекция се причинява от L. interrogans, патогенният представител на рода Leptospira.Инфекцията се разпространява чрез урината от животното гостоприемник.
След инфекцията лептоспирите присъстват в кръвта, докато не бъдат изчистени след 4 до 7 дни след производството на анти-L.interrogans антитела, първоначално от клас IgM.Културата на кръв, урина и цереброспинална течност е ефективно средство за потвърждаване на диагнозата през 1-вата до 2-рата седмица след експозицията.Серологично откриване на antiL.interrogans антитела също е общ диагностичен метод.Предлагат се тестове в тази категория: 1) Тест за микроскопска аглутинация (MAT);2) ELISA;3) Индиректни флуоресцентни тестове за антитела (IFAT).Въпреки това, всички гореспоменати методи изискват сложно оборудване и добре обучени техници.
Leptospira IgG/IgM е прост серологичен тест, който използва антигени от L. interrogans и открива IgG и IgM антитела към тези микроорганизми едновременно.Тестът може да се извърши от необучен или минимално квалифициран персонал, без тромаво лабораторно оборудване и резултатът е наличен в рамките на 15 минути.
ПРИНЦИП
Комплектът за бърз тест Leptospira IgG/IgM е хроматография със страничен поток
имуноанализ.Тестовата касета се състои от: 1) оцветена в бордо конюгатна подложка, съдържаща рекомбинантни антигени на L. interrogans, конюгирани с колоидно злато (конюгати на Leptospira) и конюгати на заешко IgG-злато, 2) нитроцелулозна мембранна лента, съдържаща две тестови ленти (M и G ленти) и контролна лента (C лента).М лентата е предварително покрита с моноклонален античовешки IgM за откриване на анти-L.. interrogans IgM, G лентата е предварително покрита с реагенти за откриване на анти-L.interrogans IgG, а С лентата е предварително покрита с кози анти-заешки IgG.
Когато достатъчен обем тестов образец се разпредели в ямката за проба на касетата, образецът мигрира чрез капилярно действие през касетата.IgM anti-L.. interrogans, ако присъства в пробата, ще се свърже с конюгатите на Leptospira.След това имунокомплексът се улавя върху мембраната от предварително покритото анти-човешко IgM антитяло, образувайки виненочервена М лента, показваща положителен резултат от L. interrogans IgM тест.IgG anti-L.. interrogans, ако присъства в пробата, ще се свърже с конюгатите на Leptospira.След това имунокомплексът се улавя от предварително покрити реагенти върху мембраната, образувайки G лента с цвят на бордо, което показва положителен резултат от L.. interrogans IgG тест.
Липсата на тестови ленти (M и G) предполага отрицателен резултат.Тестът съдържа вътрешна контрола (C лента), която трябва да показва виненочервена лента на имунокомплекса на кози анти-заешки IgG/заешки IgG-златен конюгат, независимо от развитието на цвета на която и да е от тестовите ленти.В противен случай резултатът от теста е невалиден и пробата трябва да се тества отново с друго устройство.
